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綜合新聞

張馳博士等在《Clinical Chemistry》雜志在線發(fā)表應(yīng)用納米孔測序技術(shù)鑒定淋球菌耐藥基因的研究論文

發(fā)布日期:2020-12-28 字號:

淋病是世界常見的性傳播疾病之一,其病原體淋球菌的耐藥性作為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題受到重點(diǎn)關(guān)注。淋球菌的耐藥機(jī)制十分復(fù)雜,已知的耐藥相關(guān)位點(diǎn)分布在十余個(gè)耐藥基因中,并且呈現(xiàn)為單核苷酸多態(tài)性、馬賽克樣變異、質(zhì)粒獲得等多種形式。因此,對一株淋球菌的耐藥特征進(jìn)行完整描述,需要對十余個(gè)耐藥相關(guān)基因測序。如果使用常規(guī)的PCR-Sanger測序技術(shù),必須首先在臨床樣本中分離到淋球菌,然后完成大量的重復(fù)實(shí)驗(yàn)和序列分析,十分繁瑣。

為了解決上述問題,彭俊平課題組基于納米孔測序技術(shù)平臺,應(yīng)用多重PCR擴(kuò)增子測序的策略,僅使用一個(gè)PCR反應(yīng)就可以在臨床樣本中直接擴(kuò)增與淋球菌耐藥性相關(guān)的十余個(gè)基因。利用測序數(shù)據(jù)進(jìn)行互相校正,測序的準(zhǔn)確度可以達(dá)到99.5%以上,檢測的靈敏度可以低至31拷貝/微升。同時(shí)分析12個(gè)臨床樣本,只需要7-10個(gè)小時(shí)的時(shí)間就能得到耐藥相關(guān)基因的全序;而對已分離的菌株進(jìn)行檢測則需要的時(shí)間更短。

該方法建立之后,可以作為一個(gè)通用的流程推廣到其他重要病原體,分析其耐藥及分子流行病學(xué)特征,例如應(yīng)用于一些生長緩慢、難以培養(yǎng)的病原體,包括結(jié)核分枝桿菌、支原體、衣原體、病毒等。該方法可以作為細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)室檢測體系中的重要一環(huán),為指導(dǎo)臨床合理使用抗生素、探索病原體耐藥機(jī)制提供新的策略與思路。研究得到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與健康科技創(chuàng)新工程和國家自然科學(xué)基金的資助。

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